Volgens de WHO-statistieken zijn de afgelopen 40 jaar 25 miljoen mensen overleden aan aids. De schade van deze infectie is enorm. De meeste geïnfecteerden bleken in Afrika te zitten, waar deze infectie vandaan kwam. Met HIV wordt de diagnose van de ziekte bijzonder relevant. Het is waar dat er nog geen behandelingen voor hiv zijn, maar een vroege behandeling kan het leven van de patiënt verlengen en de kwaliteit ervan verbeteren.
Diagnose van HIV-infectie
HIV-infectie wordt in verschillende stadia op de volgende manieren vastgesteld:
- ELISA - enzym-immunoassay.
- Western blot.
- PCR - polymerasekettingreactie.
- Snelle tests.
De PCR-methode is ontwikkeld door de Amerikaanse biochemicus Kary Mullis, die er in 1983 de Nobelprijs voor ontving. Tegenwoordig wordt deze methode in de geneeskunde voor de diagnose van alle infecties als de belangrijkste beschouwd vanwege de nauwkeurigheid en informatie-inhoud. HIV is in dit opzicht geen uitzondering.
De essentie van de analyse
Elke levende cel bevat RNA en DNA. Deze nucleïnezuren zijn in staat tot zelfkopie en zelfreplicatie. Voor elke infectie zijn DNA-fragmenten uniek. BIJin biologische vloeistoffen circuleren deze fragmenten van nucleïnezuren. Ze worden opgevangen en herkend door speciale apparatuur - de reactor. Dit is de basis van de methode. De laboratoriumassistent telt deze fragmenten. Het retrovirus HIV wordt gecontroleerd op RNA. Zelfs met enkele kopieën van virale deeltjes kan PCR ze detecteren en tellen.
Veneus bloed wordt meestal als testvloeistof gebruikt. De speciale componenten van de methode binden zich aan de virusdeeltjes en maken ze detecteerbaar, doordat de gevonden fragmenten worden vermenigvuldigd.
In het geval van HIV kan het resultaat van de aanwezigheid van het virus worden verkregen lang voordat de kliniek verschijnt. Daarom heeft PCR vanwege zijn hoge gevoeligheid zo'n hoge diagnostische waarde. Een groot pluspunt van PCR is de veelzijdigheid van de methode. De incubatietijd van infectie voor PCR is geen obstakel.
Onderzoekskosten
PCR-methode is vrij duur. Dit is een van de grote nadelen. Het vereist de nieuwste apparatuur en hooggekwalificeerde laboratoriumassistent. Gezien het voorgaande vindt PCR-diagnostiek niet plaats in kleine nederzettingen. U kunt zich alleen laten testen in gespecialiseerde grote klinieken.
De kosten van HIV-DNA-tests in klinieken in Moskou beginnen bij 2.800 roebel, virale belasting (viraal RNA in plasma) wordt bepaald door PCR - vanaf 8.800 roebel en HIV-resistentie tegen proteaseremmers - vanaf 16.500 roebel. Zoals je kunt zien, zijn de prijzen behoorlijk hoog. PCR kan gratis worden gedaan in openbare klinieken onder het MHI-beleid. Belangrijk,dat de procedure anoniem kan worden uitgevoerd. In het register krijgt de patiënt een nummer waarmee hij de uitslag kan achterhalen. In moderne medische centra zijn er persoonlijke accounts van cliënten waar deze gegevens worden ingevoerd.
Onderzoeksdoelen
PCR-diagnostiek voor hiv wordt in dergelijke gevallen voorgeschreven:
- Detectie van infectie bij een kind van een zieke moeder of drager om intra-uteriene infectie vast te stellen.
- Als de ELISA twijfelachtige resultaten gaf (PCR voor HIV helpt in dit geval om een definitieve diagnose te stellen).
- Om de kwantitatieve inhoud van het virus in het lichaam te detecteren.
- Met een positieve immunoblot vullen ze elkaar aan met PCR.
- Donateurs testen.
- Voor een vroege diagnose van HIV.
- Om de werkzaamheid en resistentie tegen ART te bepalen.
Het voordeel van deze analyse is dat PCR voor hiv zelfs kan worden uitgevoerd bij kinderen jonger dan één jaar.
Onderzoek wordt vaak niet uitgevoerd voor de primaire diagnose, maar is al in behandeling. Primaire diagnostiek zijn serologische onderzoeken (ze bepalen het niveau van antilichamen tegen HIV). Als een fout-positieve uitslag wordt herhaald, kan dit met een lage viral load zijn.
PCR diagnosticeert hiv als er nog geen antistoffen tegen zijn. De ELISA-methode zal in dit geval geen antwoord geven.
En PCR voor HIV zal al positief zijn. Maar de symptomen van deze hiv-periode zijn niet-specifiek. De patiënt wordt voor ARVI eerst langdurig en zonder succes behandeld door een huisarts. Houd er rekening mee dat de diagnose van hiv alleen is gebaseerd op:PCR is niet gezet, het is noodzakelijk om andere uitgebreide tests te doorstaan. De PCR-methode is vaker een hulpmiddel voor moeilijke gevallen.
Analyse voorbereiden
Voordat u PCR voor hiv gebruikt, 2 dagen voor de test, mag u geen vet voedsel of alcohol eten. Ook mentaal en fysiek is het beter om niet te belasten. Als de patiënt een kuur met immunostimulatie wordt voorgeschreven, wordt deze 2 weken voor de analyse stopgezet.
Bloed kan het beste 's ochtends worden afgenomen. Andere biologische vloeistoffen van het lichaam (sperma, vaginale afscheiding) kunnen ook worden onderzocht, maar bloed is de beste stof. Speeksel, zweet, urine en tranen worden niet gebruikt, omdat de inhoud van het virus daarin minimaal is.
Pluspunten van PCR voor HIV
De voordelen van de methode zijn de extreem lage kans op een fout-positief resultaat, de universaliteit van de reactie voor alle biologische vloeistoffen van het lichaam. Analyse heeft een breed bereik:
- Eén bloedafname kan worden gebruikt om verschillende infecties op te sporen.
- De techniek is dringend, het resultaat is de volgende dag klaar.
- Vertrouwen ligt tussen 85 en 98%.
- De aanwezigheid van hiv kan 10-14 dagen na infectie worden vastgesteld (er zijn op dit moment nog geen antistoffen).
- Geen leeftijdsgrens, kan direct vanaf de geboorte worden uitgevoerd.
Nadelen van de methode
De nadelen van PCR zijn als volgt:
- Analysekosten.
- Vereist geavanceerde medische apparatuur.
- Vereist hooggekwalificeerde laboratoriumassistent en arts,nemer analyse.
- De reactie is zeer gevoelig, dus de fout kan 20% zijn.
- Kan resulteren in een vals-positief resultaat als de patiënt auto-immuunprocessen, oncologie, chronische infecties heeft.
- Bijzondere netheid van de laboratoriumruimte is noodzakelijk, omdat het virus vanuit de lucht in de analyse kan komen. Dan is het resultaat verkeerd.
Voor laboratoria die PCR uitvoeren, zijn om de kwaliteit van de diagnostiek te verbeteren, speciale strikte maatregelen ontwikkeld volgens het SanPiN-systeem voor interne controle. Bovendien moeten alle werkregels met deze techniek in acht worden genomen:
- Vereist om de informatie op de reageerbuisjes strikt op te volgen.
- Kijk voor de bloedafname opnieuw en zorg ervoor dat de analyse is gepland.
- De verpleegster moet de buisjes correct labelen.
- De laboratoriumassistent moet alle manipulaties met het biomateriaal correct uitvoeren om kruisbesmetting te voorkomen.
- Het testsysteem moet van uitstekende kwaliteit zijn.
Alleen als aan al deze voorwaarden is voldaan, kan de fout in het antwoord slechts ongeveer 2% van de afleveringen zijn.
Analyseduur
Velen zijn geïnteresseerd in hoe lang PCR voor HIV klaar zal zijn. De diagnose duurt niet langer dan 8 uur. De patiënt kan de volgende dag al een antwoord krijgen. Express testen worden binnen 2 uur uitgevoerd.
PCR-betrouwbaarheid
Ondanks de vele voordelen wordt PCR niet als een ideale diagnostische methode beschouwd. Er wordt contact met hem opgenomen voor het gevalde noodzaak om screeningtests te verkrijgen voor de aanwezigheid van HIV in het lichaam.
Wanneer wordt er bloed afgenomen voor analyse?
Hoe lang moet ik PCR gebruiken voor hiv? Een betrouwbaar resultaat kan al worden verkregen bij bloedafname 4-4 dagen na de vermeende infectie. Na 2 weken zal de betrouwbaarheid voor HIV 98% zijn, en met een periode van 5 dagen - 80%. De aanwezigheid van een negatief resultaat in PCR voor HIV zal betrouwbaar zijn, maar voor een absoluut nauwkeurig resultaat wordt ook ELISA uitgevoerd.
ELISA-analyse is alleen effectief als er antilichamen tegen het virus zijn, deze tijd kan 1-3 maanden tot zes maanden duren. Aangezien ELISA een hogere kans geeft (98% -99,9%), kan PCR geen 100% bevestigende test voor de aanwezigheid van HIV-infectie worden genoemd. Maar aan de andere kant is dit de enige techniek waarbij je niet hoeft te wachten op het verschijnen van antilichamen.
Met HIV kan PCR informatie verschaffen over de effectiviteit van ART, het stadium van HIV-ziekte en het aantal VN's (een kwantitatieve beoordeling van de aanwezigheid van HIV in het lichaam). Dit zegt iets over de ernst en omvang van de verandering.
PCR-testen voor hiv zijn ook nodig als er antilichamen in het bloed zijn, maar de aanwezigheid ervan wijst niet op de klinische betrouwbaarheid van hiv-infectie.
Ze worden niet alleen getest op infectie en losse seks. Andere gelegenheden:
- Zwangerschap plannen.
- Aanstaande operatie.
- Informele seks.
- Sommige beroepen vereisen deze test voor toelating tot het werk (leraren, artsen en ander medisch personeel).
- Gevangenen.
- TB-patiënten.
- Medewerkers van het Ministerie van Noodsituaties en de politie.
- Teruggekeerd van vakantie uit exotische landen (als je zeker wilt weten dat er geen infectie is).
- Prostituees.
- Buitenlandse studenten.
- Drugs.
Ook kunnen bepaalde symptomen bij een patiënt een hiv-test afdwingen:
- Plotseling gewichtsverlies.
- Diarree die langer dan 3 weken aanhoudt
- Lange tijd onredelijk hoge temperatuur.
- Gezwollen lymfeklieren.
- Onverklaarde oorzaak van longontsteking, candidiasis, enz.
Het ontcijferen van de analyse is het voorrecht van de behandelend arts, niet de laboratoriumassistent.
PCR of ELISA, wat is beter?
Wanneer PCR-diagnose van HIV-virus-RNA zowel kwalitatief als kwantitatief wordt gedetecteerd. Deze analyse identificeert duidelijk een specifiek pathogeen, zelfs als er meerdere kruisreagerende pathogenen zijn. Biologisch materiaal kan zelfs in gedroogde vorm worden gebruikt. Het nadeel is de hoge gevoeligheid van PCR, wanneer een vals-positief resultaat kan worden gegeven door de aanwezigheid van zelfs een kleine hoeveelheid vreemd DNA op instrumenten of een reageerbuis.
De taak en mogelijkheid van ELISA is om de aanwezigheid van antilichamen tegen een retrovirus te bepalen. Hoewel de nauwkeurigheid 99% is, is het niet van toepassing in de vroege stadia.
Kwalitatieve hiv-testen
Hoogwaardige PCR voor hiv bepa alt de aanwezigheid van het virus in het lichaam. De resultaten zien er in dit geval als volgt uit: positief, vals positief, negatief. Maar deze studie geeft geen informatie over de hoeveelheid retrovirus. Zo'n kwalitatieve analyseongepast wanneer HIV-infectie al op andere manieren in het lichaam is gedetecteerd.
Het is onmogelijk om de effectiviteit van de behandeling te controleren met hoogwaardige PCR.
HIV-kwantificering
Alleen uitgevoerd door hiv-geïnfecteerde mensen om het aantal kopieën van virus-RNA in een biologisch product te tellen.
Het doel van zo'n onderzoek is om de lopende behandeling te volgen en de resistentie van het virus ervoor te identificeren. Antivirale therapie bij dergelijke berekeningen wordt niet blindelings voorgeschreven door een arts, dus het zal effectiever zijn. Kwantitatieve PCR voor hiv-infectie wordt veel vaker gedaan. Deze analyse wordt weergegeven als een kopie/ml bloed.
Welke resultaten kunnen worden gegeven:
- Virus-RNA is afwezig of zeer klein (ongeveer 20 kopieën/ml). Geen zekerheid van diagnose.
- Van 20 - tot 10 tot de 6e graads kopieën / ml - de diagnose is betrouwbaar.
- Meer dan 106 kopieën/ml - hoge VN.
Laboratoria kunnen re altime PCR-tests voor hiv uitvoeren. Dit impliceert de observatie en numerieke evaluatie van de accumulatie van PCR-producten met automatische registratie van resultaten.
