Wat is bacteriologisch onderzoek? Volgens welk schema wordt het uitgevoerd? Wat wordt in dit geval bedoeld met veiligheid? Wat zijn de doelen en stadia van bacteriologisch onderzoek?
Algemene informatie
Bacteriologisch onderzoek is een wetenschappelijk proces waarbij bacteriën worden geïdentificeerd en hun eigenschappen worden bestudeerd om een microbiologische diagnose te stellen. Van groot belang hierbij is de bepaling van het type of de soort van het resulterende micro-organisme (puur cultuur wordt geïmpliceerd). Dit gaat gepaard met de studie van de biochemische en fysiologische eigenschappen van organismen, evenals de neiging tot toxinevorming. Voor deze doeleinden worden precipitatie- en agglutinatiereacties gebruikt. Het wordt ook toegepast om proefdieren te infecteren met daaropvolgende detectie van pathologische veranderingen.
Werken met testmateriaal
Het bacteriologische onderzoeksalgoritme zorgt voor strikte naleving van speciale instructies. Het testmateriaal moet dus onder aseptische omstandigheden in steriele schalen worden verzameld. Het is ook noodzakelijk om te zorgen voorom de levering aan het laboratorium zo snel mogelijk te verzekeren. Koude opslag van monsters is wenselijk. De techniek van bacteriologisch onderzoek voorziet in vele mogelijke situaties. Zo maken het type object, de eigenschappen van het micro-organisme en de aard van de ziekte het vaak noodzakelijk om individuele werkinstructies te ontwikkelen. In het werk wordt een groot aantal verschillende methoden gebruikt. Een van de meest voorkomende is bacterioscopie. Maar als de bacteriën niet worden gefixeerd, wordt een geplette of hangende druppel gebruikt. Opgemerkt moet worden dat de laatste twee opties worden gekenmerkt door een verhoogde mate van besmettelijkheid.
Bacterioscopy
In dit geval worden streken gebruikt. Om ze te maken, moet je een druppel van de vloeistof die wordt bestudeerd over het oppervlak van een glasplaatje verdelen. Zates zou het moeten drogen. Dit wordt vaak gedaan door het medicijn door een vlam te bewegen die is verkregen uit een gasbrander. Hoewel fixatiemiddelen als alternatief kunnen worden gebruikt. Om aan te geven dat er voorbereidende handelingen met dit preparaat zijn uitgevoerd, wordt het gekleurd. Het doel van een dergelijke manipulatie is nauwkeurigheid, wat erg belangrijk is bij microscopisch en bacteriologisch onderzoek. Immers, als je het medicijn voor een ander doel hergebruikt, krijg je pap, waar je heel moeilijk effectief mee kunt werken.
Waarom bacterioscopie zo populair is
Niet in de laatste plaats vanwege de beschikbaarheid van deze methode. Als een bacteriologisch onderzoek van een vers preparaat wordt uitgevoerd, dan om de ziekteverwekker te bepalenmicrochemische reacties of selectieve kleuring van verschillende structurele delen van het micro-organisme kunnen worden gebruikt. Welke is beter? Een nauwkeuriger resultaat kan worden verkregen bij het werken met een gekleurd preparaat. In dit geval wordt het testmateriaal op een vooraf voorbereid glasplaatje aangebracht. En zorg voor een dunne (en indien mogelijk zelfs) laag. Daarna moet je wachten tot het medicijn in de lucht opdroogt. De micro-organismen worden vervolgens gefixeerd met behulp van een van de conventionele methoden. Daarna wordt het gekoelde preparaat gekleurd met een differentiële of eenvoudige verf. Hiervoor kunnen droge en inheemse preparaten worden gebruikt. Daarna blijft het over om ultraviolette of korte blauwe stralen naar de plaats van ophoping van organismen te richten, waardoor de hele microbe of bepaalde delen van zijn lichaam gloeien.
Praktische toepassing van bacterioscopie
Het wordt gebruikt om een aantal infectieziekten te diagnosticeren. De bekendste hiervan zijn tuberculose, gonorroe en recidiverende koorts. Bovendien nemen ze hun toevlucht tot onderzoek om het hele complex van microflora van een orgaan of product te bestuderen. Maar critici wijzen vaak op de relatieve onbetrouwbaarheid en onnauwkeurigheid van deze methode.
Gewassen en subculturen van bacterieculturen
Voer ze uit met een pasteurpipet. Het uitvoeren van bacteriologisch en cytologisch onderzoek is vaak moeilijk uit te voeren zonder inoculatie en subcultuur tijdens de workflow. Wanneer u met een pasteurpipet werkt, is de tipafbreken met een pincet. Het gereedschap zelf wordt vervolgens door de vlam van de brander gedragen en vervolgens afgekoeld. Overigens kunnen voor het zaaien zowel vloeibare als vaste voedingsbodems worden gebruikt. De keuze wordt beïnvloed door welke doelen van bacteriologisch onderzoek worden nagestreefd. Tegelijkertijd moet u zich houden aan het algoritme van werk- en veiligheidsmaatregelen. Bij het werken met een vloeibare voedingsbodem moet er dus op worden gelet dat deze niet uitloopt en de randen van de kurk en de reageerbuisjes niet nat maakt. Wanneer het onderzoek wordt uitgevoerd met vast materiaal, wordt vaak een speciale naald gebruikt om de kweek binnen te gaan. Wanneer zaaien en opnieuw zaaien worden uitgevoerd, moeten ze worden uitgevoerd in de buurt van de vlam van een gasbrander. Voor de zuiverheid van het experiment mag de reageerbuis niet lang open blijven staan. Wat betreft het gereedschap met cultuur: je moet ervoor zorgen dat het niets aanraakt. Ook zorgt de techniek van bacteriologisch onderzoek ervoor dat de randen van de reageerbuis worden verbrand voordat deze wordt gesloten. Een afgewerkt product moet onmiddellijk na productie worden ondertekend om toekomstige verwarring te voorkomen.
Zaai-efficiëntie
Er wordt aangenomen dat deze methode het mogelijk maakt om nauwkeurigere en betrouwbaardere gegevens te verkrijgen tijdens bacteriologische diagnose dan de eerder overwogen bacterioscopie. In dit geval is het algoritme van acties als volgt:
- Aanvankelijk wordt een pure cultuur uitgesmeerd over het oppervlak van het voedingsmedium, dat in een petrischaal wordt gegoten.
- Het eerste zaaien moet gebeuren in omstandigheden die gunstig zijn voor de soortmicro-organismen.
- Na een dag of twee, in aanwezigheid van een optimale omgeving, verhuizen alle geschikte kolonies naar waar ze zich maximaal kunnen ontwikkelen. Dit bevrijdt ze dus van vreemde microflora.
Het eindresultaat is een kweek van homogene bacteriën die kunnen worden geïdentificeerd.
Pure culturen
Maar hoe worden ze gemaakt? Hiervoor worden biologische en mechanische methoden gebruikt. In het eerste geval wordt een grote rol gespeeld door voedingsmedia, waar de noodzakelijke omstandigheden gunstig zijn voor de ontwikkeling van een bepaalde cultuur. Een aanpak kan ook worden toegepast wanneer proefdieren die vatbaar zijn voor een bepaald type bacterie besmet raken. Mechanische methoden zijn gebaseerd op het gebruik van een steriel instrument, waarmee de cultuur wordt geplaatst in een voedingsbodem in de eerste, tweede en derde petrischaal. Dan is het noodzakelijk om te wachten tot individuele kolonies groeien, en een zuivere cultuur zal zich al van hen onderscheiden. Bacteriën kunnen ook worden gekweekt in speciale thermostaten, waarbij de temperatuur op een bepaald niveau wordt gehouden (meestal ongeveer 37 graden). In dit geval duurt het proces ongeveer een dag. Maar, afhankelijk van het type micro-organismen, kunnen andere termen worden vastgesteld. Ook belangrijk is de aanwezigheid van de benodigde zuurstofconcentratie. Gebruik hiervoor verschillende beluchtingsmethoden. Tot nu toe hebben we het gehad over de situatie als geheel en in het algemeen, maar laten we nu onze aandacht richten op wat het schema van bacteriologisch onderzoek is.
Oefen
Een reeks methoden wordt vaak gebruikt om pathogene micro-organismen in het lichaam van een patiënt of potentiële drager te detecteren. De gebruikte materialen en methoden zijn afhankelijk van de doelen van de analyse, maar ook van de omstandigheden van de omgeving waarin het werk wordt uitgevoerd. In de praktijk worden bacteriën meestal gedetecteerd via bloedkweken van een persoon of dier. Als lokale laesies goed gedefinieerd zijn, kunnen ziekteverwekkers worden gezocht in probleemgebieden. Dit is typerend voor aandoeningen als dysenterie, gonorroe, difterie en dergelijke. In bijzonder ernstige gevallen is dit proces verdeeld in afzonderlijke stadia van bacteriologisch onderzoek (wat typisch is voor buiktyfus). Elk van hen gebruikt zijn eigen methoden, die gericht zijn op het vinden van de oorzaak van infectie. Laten we de situatie met buiktyfus eens nader bekijken. In de eerste week van de ziekte is bloedkweek de meest betrouwbare manier om de ziekte te diagnosticeren. Ten tweede wordt een serologisch onderzoek als zodanig beschouwd. In de derde week wordt de ontlasting onderzocht. De laatste methode wordt beschouwd als het controleren van herstellende personen.
Micro-organisme identificatie
Het begint met het proces van het verven. Vervolgens kijken ze hoe de bacterie koolhydraten, aminozuren, enzovoort kan afbreken. Bovendien kan dit proces worden aangevuld door de studie van andere eigenschappen die elk afzonderlijk geslacht of soort micro-organismen bezit. Als voorbeeld moeten de mogelijkheden voor het oplossen van erytrocyten van verschillende dieren, het effect op de bloedplasmacoagulatie en het oplossen van stolsels worden gegeven.fibrine enzovoort. Dit alles zijn de onderscheidende kenmerken van individuele vertegenwoordigers van de microwereld. Ook kan serologische identificatie gebruikt worden voor definitieve herkenning (maar dit betreft meestal pathogene bacteriën die tot de darmfamilie behoren).
Conclusie
Opgemerkt moet worden dat een aantal micro-organismen niet kunnen worden geïdentificeerd met de methoden die in het artikel worden beschreven. In dit geval wordt veel gebruik gemaakt van de praktijk van het infecteren van proefdieren. De berekening is gemaakt op het feit dat karakteristieke toxigeniciteit of pathogeniteit zal optreden, wat niet wordt waargenomen onder kunstmatige omstandigheden. Infectie kan ook worden gebruikt als een methode voor de accumulatie van pathogene microben. En al wanneer de kenmerken van de bestudeerde cultuur, gevonden tijdens het bestuderen van biologische, morfologische, serologische en biochemische eigenschappen, worden vergeleken, kunnen we zeggen dat het bekend is met wat voor soort microben we te maken hebben. Identificatie betekent een aanduiding van het geslacht, de soort en het type bacterie. Indien het onderzochte micro-organisme op bepaalde eigenschappen afwijkt van zijn typische eigenschap, moet dit worden aangegeven. Een aantal experts is van mening dat het in dergelijke gevallen nuttig zal zijn om alle gebruikte methoden en technieken opnieuw te identificeren met duplicatie. Soms kan onderzoek naar een hoger niveau worden getild, wat een serieuzere (en duurdere) aanpak vereist. Als er negatieve resultaten werden verkregen, geeft dit aan dat de voorbereidingmicro-organismen ontbraken of waren niet levensvatbaar. Maar voor de juistheid van het onderzoek geldt dat als een aantal dragers van bacil wordt vermoed (dysenterie, difterie, buiktyfus), in dergelijke gevallen herhaalde controles worden getoond. Dit is nodig zodat specialisten een goed beeld hebben van waar ze mee te maken hebben.
