Hepatitis C is een infectie van de lever die wordt veroorzaakt door het Flaviviridae HCV-virus, dat uit een of meer RNA-moleculen bestaat. In de regel wordt een reeks diagnostische maatregelen genomen om hepatitis C bij een patiënt vast te stellen. PCR is een analyse die de diagnose nauwkeurig bevestigt. Vaak wordt de conclusie getrokken door artsen wanneer de patiënt al de eerste tekenen van de ziekte heeft.
Wat is hepatitis C
Leverbeschadiging door een virale infectie overgedragen via bloed of seksueel contact wordt in de geneeskunde hepatitis C genoemd. De veroorzaker is een RNA-bevattend virus van niet-cellulaire infectieuze agentia van de familie Flaviviridae. De infectie kan lang in het lichaam blijven zonder zich te tonen. Daarom wordt hepatitis C (als diagnose) alleen als gerechtvaardigd beschouwd wanneer een micro-organisme wordt gedetecteerd met behulp van een bloedtest met PCR-RNA-RNA.
Flavivirus wordt niet geproduceerd in kunstmatig gekweekte geïsoleerde cellen. Tijdens het reproductieproces creëert het infectieuze agens immunologisch verschillende modificaties. Deze factoren voorkomen dat het lichaam geeftpassende beschermende reactie, en experts hebben moeite met het ontwikkelen van een effectief vaccin.
Het virus wordt parenteraal overgedragen. Voor infectie moet het in voldoende hoeveelheden rechtstreeks in de bloedbaan terechtkomen.
Welke tests worden er gedaan op hepatitis C
Virale pathologieën van de lever worden gediagnosticeerd met behulp van laboratoriumtests. Klinische studies van hepatitis C worden uitgevoerd door vreemde en gevaarlijke antigenen of eiwitverbindingen (antilichamen) in het biomateriaal van de patiënt te bestuderen, voornamelijk in het bloed.
- Enzymatische immunoassay (ELISA). De methode is gebaseerd op de detectie van IgM-antilichamen in het bloed. Immunoglobuline wordt als de grootste beschouwd en is een pentameer. Het manifesteert zich in de primaire beschermende reactie van lymfocyten op een onbekende vreemde substantie.
- Radioimmunoassay (RIA) - kwantitatieve bepaling van IgM-immunoglobuline met behulp van een gelabelde radioactieve isotoop van jodium.
- PCR van hepatitis C - bepaling van viraal RNA in het biomateriaal (bloed). Deze analyse bevestigt op betrouwbare wijze de diagnose.
IgG-testen zijn niet betrouwbaar. De aanwezigheid ervan in het bloedserum kan niet alleen wijzen op de aanwezigheid van een flavivirus, maar ook op een andere eerdere infectie met dezelfde ziekteverwekker.
Wat bepa alt de PCR-analyse
Polymerasekettingreactie (PCR) is gebaseerd op de identificatie van DNA-regio's die specifiek zijn voor bepaalde pathogenen in monsters van materiaal voor onderzoek (epitheel, bloed). De analyse maakt het mogelijk om pathogene kleinste organismen (virussen) te identificeren door hun RNA of DNA in biologisch materiaal te detecteren.
Laboratoriumprocedure voor de detectie van antilichamen Hepatitis C PCR wordt in 3 fasen uitgevoerd:
- Selecteer. Het bestudeerde biomateriaal wordt gezuiverd van onzuiverheden en DNA wordt verkregen in de mobiele fase van de chromatografische kolom.
- Versterking. De analyse wordt uitgevoerd in de device-thermostaat cycler. Het verwarmt en koelt de reageerbuisjes met een zekere cycliciteit. Voor één onderzoek worden maximaal 35 cycli uitgevoerd. Het resultaat is een voldoende aantal DNA-fragmenten om de ziekteverwekker te detecteren, identificeren en evalueren.
- Elektroforese. De resulterende fragmenten worden in een gel geplaatst met verschillende verzadiging van agarose en elektroforese wordt uitgevoerd. Het resulterende elektroferogram wordt op een computer geanalyseerd.
Niet alleen de standaard PCR-studie wordt gebruikt, maar ook de Real Time PCR-analyse. Dit is re altime diagnostiek. De methode maakt kwalitatieve en kwantitatieve analyse mogelijk, wat het mogelijk maakt om de vorming en dynamiek van de ziekte te identificeren, en om therapie voor te schrijven die gericht is op het elimineren van de oorzaak van de oorsprong van de pathologie. Re altime PCR wordt ook gebruikt om een zuivere cultuur van infectieuze agentia te bepalen (genotypering).
Hoe wordt de polymerasekettingreactietest uitgevoerd
Voor de diagnose kan elke menselijke biologische vloeistof worden gebruikt. Biomateriaal voor het testen op hepatitis C is meestal bloed.
Sample voor diagnostiek wordt uitgevoerd in de procedurekantoor. Gebruik voor het afnemen van bloed wegwerpreageerbuisjes met een stof die de bloedstolling remt. Activiteiten gericht op het voorkomen van de verspreiding van infectieuze agentia helpen voorkomen dat een andere stam van micro-organismen van buitenaf binnenkomt.
Bloed voor PCR van hepatitis C wordt 's ochtends op een lege maag ingenomen. Het monster wordt direct naar het laboratorium gestuurd. Het is toegestaan het biomateriaal op te slaan bij een temperatuur van +4 tot +8 graden Celsius. Containers zijn gelabeld en voorzien van instructies. Testresultaten zijn binnen 48 uur beschikbaar, soms eerder.
Typen PCR
Het toepassingsgebied van de polymerasekettingreactie is vrij breed. Infectionists bepalen met behulp van PCR hepatitis B, ziekten overgedragen door bloedzuigende insecten, aids, tuberculose. In de oncologie worden met deze methode tumorcellen in een vroeg stadium gedetecteerd.
Er zijn ongeveer veertien soorten analyses. Het gebruik van een of ander type is afhankelijk van de omvang en de uiteindelijke resultaten van de analyses. Sommige soorten PCR zijn onmisbaar als het resultaat binnen 20 minuten nodig is.
Om hepatitis C te diagnosticeren, worden 3 soorten polymerasekettingreacties gebruikt:
- Kwalitatieve beoordeling kan ofwel positief zijn, wat wijst op de aanwezigheid van een infectie in het lichaam, of negatief, wat wijst op de afwezigheid van een flavivirus.
- Real-time PCR (kwantitatieve analyse) - bepa alt het kwantitatieve RNA van het pathogeen in IE/ml.
- Genotypering is een analyse die het type (genotype) van het virus onthult.
Om de ziekte nauwkeurig te identificeren en te bepalen, gevolgd dooralle drie de soorten onderzoeken worden gebruikt om een optimale therapie voor te schrijven.
Kwalitatieve analyse van de polymerasekettingreactie
Een analyse is verplicht voor iedereen die een ELISA heeft die antilichamen tegen HCV heeft gedetecteerd. De kwalitatieve PCR voor hepatitis C is de standaard gevoeligheidstest. De methode is alleen gericht op detectie, er wordt niet geteld of geïsoleerd van andere stoffen.
Voor het detecteren van antilichamen worden speciale testsystemen gebruikt met een gevoeligheidsdrempel van minimaal 50 IE/ml. Als antilichamen worden gedetecteerd, worden andere verhelderende tests voorgeschreven. Als het resultaat negatief is, wordt er niet verder getest.
In sommige gevallen kan een vals-negatief resultaat te wijten zijn aan incompetent laboratoriumpersoneel of reagentia van slechte kwaliteit. Voor verzekeringen is het beter om de analyse ergens anders te herhalen.
Kwantitatieve PCR
De methode wordt gebruikt om het aantal flavivirussen in één reactiecyclus direct te bestuderen. Voor nauwkeurige meting worden DNA-fragmenten gebruikt voor hybridisatie of fluorescent gelabelde primers gebruikt. Er is een voordelige detectieoptie met behulp van de SYBL Green-kleurstof. De kleurstof zit ingeklemd in een kleine groef in het DNA en wordt blauw als het wordt bestraald met een laser.
Concentratie wordt bepaald door de apparaatversterker in digitaal equivalent. Waarden kunnen enigszins verschillen tussen laboratoria en moeten daarom worden vergeleken met referentiewaarden.
Kwantitatieve PCRhepatitis C helpt bij het kiezen van de optimale dosering van medicijnen en het bepalen van de duur van de therapie. De frequentie van het onderzoek hangt af van het stadium van de ziekte, het type genotype en de voorgeschreven behandelingskuur.
Genotypebepaling
Het hepatitis C-virus heeft een variabele genetische samenstelling. Talrijke aanpassingen maken het onmogelijk om een vaccin te maken en bemoeilijken ook de therapie. In totaal zijn 11 genotypen en 100 subtypen geïdentificeerd en geregistreerd. In de landen van de voormalige USSR detecteert PCR bij met hepatitis C geïnfecteerde personen voornamelijk de genotypen 1b en 3.
In aanwezigheid van een van de genotypen kan cirrose of leverkanker stoeien. Daarom is het zo belangrijk om het virus op tijd te detecteren.
Voor sommige patiënten zijn bepaalde medicijnen die zijn ontworpen om HCV te bestrijden giftig. Met genotypering kunt u het type eiwit bepalen en een effectief medicijn voorschrijven.
In de resultaten van typetests staat een nummer met een kleine Latijnse letter die het genotype van het virus aangeeft. Als HCV wordt gedetecteerd maar niet wordt getypt, betekent dit dat de persoon een genotype heeft dat niet typisch is voor een bepaald geografisch gebied.
Analyseresultaten
De dokter houdt zich bezig met het ontcijferen van de resultaten. Alleen gegevens uit verschillende onderzoeken (samen met anamnese en onderzoek) kunnen een algemeen reëel beeld geven van de medische geschiedenis.
- Bij een gezond persoon detecteert een test voor een kwalitatieve reactie in het biomateriaal niets. Als de waarde "gedetecteerd" wordt aangegeven, wordt de infectie bevestigd en de patiëntheeft verdere diagnose nodig, gevolgd door behandeling.
- Bepaling van het aantal infectieuze agentia maakt het mogelijk om de virale belasting op het lichaam te beoordelen. Normaal gesproken detecteert hepatitis C kwantitatieve PCR het pathogeen niet. Een indicator tot 810^5 wordt als een lage belasting beschouwd en garandeert bij juiste therapie een gunstig resultaat. Hogere waarden vereisen een diepgaand onderzoek en bepaling van langdurige therapie, voor de positieve uitkomst waarvan niemand kan instaan.
- Positieve genotyperingsresultaten geven aan welk genotype wordt herkend. Een negatief resultaat duidt op ofwel de afwezigheid van een flavivirus ofwel de aanwezigheid van een genotype dat niet typisch is voor deze regio.
Wat geeft een positieve PCR-test aan
Elke ernstige ziekte vereist een uitgebreide diagnose. Een positieve hepatitis C-PCR bevestigt de diagnose, maar voorspellingen kunnen alleen worden gedaan na aanvullende laboratorium- en instrumentele onderzoeken.
Detectie van een virus geeft geen volledig beeld van de pathologie. Het is noodzakelijk om het type en de aard ervan te identificeren, om te bepalen hoe het de lever en andere organen beïnvloedt. Vroege detectie van HCV heeft vaak een gunstig therapeutisch resultaat.
Negatieve PCR met positieve ELISA
Bij het observeren van de symptomen die kenmerkend zijn voor leverbeschadiging, is de kans groot dat de infectie het lichaam al is binnengedrongen. Neem daarom contact op met een hepatoloog of een specialist infectieziekten. Tijdens de interviews zal de specialist een anamnese verzamelen en het nodige onderzoek voorschrijven.
Alsde resultaten van onderzoeken naar hepatitis C-PCR zijn negatief en de enzymimmunoassay is positief, dit duidt op de aanwezigheid van antilichamen tegen het flavivirus in het bloed. Dit gebeurt meestal wanneer de infectie in een kleine hoeveelheid het lichaam binnendringt, dus het immuunsysteem heeft het zelf aangepakt. Maar dergelijke mensen worden nog steeds als besmet beschouwd en moeten elke 6 maanden worden onderzocht. Als een persoon met dergelijke testresultaten een gratis medisch onderzoek wordt geweigerd, is het beter om tegen betaling een PCR te nemen om de gezondheid te behouden, en als de resultaten positief zijn, neem dan contact op met een specialist voor diagnose en behandeling.
Voor- en nadelen van de methode
Bij het stellen van de diagnose hepatitis C heeft PCR verschillende voordelen:
- Vroege detectie van ziekteverwekker.
- Nauwkeurige definitie van het virus.
- Efficiëntie van diagnostiek.
- Minimum foutenpercentage.
- Hoge gevoeligheid.
Nadelen van de methode:
- Hoge kosten van analyse. De test vereist dure apparatuur, reagentia en hooggekwalificeerd medisch personeel. Alles bij elkaar komt het neer op een aanzienlijk bedrag.
- Strenge eisen voor het transport van biomateriaal.
Behandeling van leverontsteking
PCR-analyse voor het hepatitis C-virus wordt als fundamenteel voor de diagnose beschouwd, maar is niet definitief. Om de therapie effectief te laten zijn, zijn een aantal aanvullende laboratorium- en instrumentele onderzoeken vereist. Na alles te hebben doorstaandiagnostische maatregelen de arts schrijft de behandeling voor:
- Dieet 5 is voorgeschreven.
- Alcohol is volledig uitgesloten.
- Gezamenlijke ontvangst van interferon en ribavirine gedurende 25 dagen.
- Cursussen van hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- In speciale gevallen wordt discrete plasmaferese gebruikt.
Door een hepatoloog voorgeschreven medicijnen worden regelmatig gebruikt, zonder de dosering te veranderen. De duur van het innemen van de medicijnen wordt bepaald door de arts na het passeren van de controletests. Na het voltooien van de therapiekuur moet u om de zes maanden naar de dokter gaan.
PCR-diagnostiek maakt het mogelijk om de veroorzaker van hepatitis C in een vroeg stadium te identificeren. Dit draagt bij aan de effectiviteit van de therapie en het voorkomen van de overgang van de ziekte naar gevaarlijke vormen als cirrose en hepatocellulair carcinoom.
